慢病毒包装技术详解:从基础到进阶
作者:宋玉 栏目:健康资讯 来源:药氪网 发布时间:2024-09-27 10:59 阅读量:12374 会员投稿
慢病毒包装技术详解:从基础到进阶
你是否对基因治疗中那些能够精准投递DNA或RNA到细胞内部的“神奇快递员—病毒载体”感到好奇?
慢病毒:逆转录病毒的智慧转型
慢病毒(Lentivirus)是一类特殊的逆转录病毒,因其独特的生物学特性而广泛应用于基因转导和基因治疗研究。与其他类型的病毒载体相比,慢病毒能够有效地将靶基因导入难以转染的细胞类型,如原代细胞和干细胞,且能够随机整合至宿主基因组中。这一特性不仅显著提升了转染效率,还确保了目标基因在细胞分裂中的稳定表达,能够传递给后代细胞,从而实现长期的基因表达。
慢病毒表达载体包含了进行基因包装、转染及稳定整合所需的全部遗传信息。其包装质粒提供了重组假病毒载体所需的所有辅助蛋白,使得转录和包装RNA得以高效完成。经过科学家们的改造,慢病毒载体不仅消除了自然感染可能带来的风险,还展现出卓越的安全性与有效性,成为现代生物医学研究中不可或缺的工具。
慢病毒载体的基因组和结构【1】
(A) 野生型HIV-1基因组简图;(B) 慢病毒的颗粒结构。
慢病毒包装:从质粒到载体的蜕变
慢病毒包装技术的精髓在于其精细的组成部分,它们共同构成了基因传递的“载体”:
包装质粒(Packaging Plasmid):提供病毒复制所需的结构蛋白基因,并巧妙地祛除了病毒的包膜基因,确保产生的病毒颗粒无法自主复制和感染其他细胞。
转移质粒(Transfer Plasmid):承载着科研人员精心挑选的“货物”——目标基因或DNA片段,它们将被安全的输送到目标细胞中。
包膜质粒(Envelope Plasmid):提供病毒外壳蛋白的基因,保护病毒核酸,并决定病毒的宿主范围和感染效率。
第三代慢病毒载体【2】
慢病毒包装的原理复杂而精妙。第三代慢病毒包装系统通过四个质粒在特定的细胞系(如293T细胞)中进行共转染。这些质粒分别携带病毒的包装信号、结构蛋白编码序列、以及目的基因。通过一系列复杂的生物化学反应,最终生成含有目的基因的慢病毒颗粒。
慢病毒包装原理
应用领域
相比其他基因传递工具,慢病毒包装能够有效感染分裂期和非分裂期细胞;整合入宿主基因组后,外源基因可长期稳定表达;经过改造的慢病毒载体已去除致病性基因,大大降低了安全风险。
随着慢病毒包装技术的不断更新,它在科研和医疗领域展现出巨大的潜力。在基因治疗方面,它已成功应用于多种遗传性疾病和癌症的治疗中;在再生医学领域,它促进了干细胞分化和组织修复的研究;在基础研究中,它更是成为基因功能验证和疾病模型构建的重要工具。
泓迅生物 | 慢病毒包装
泓迅生物经验丰富的专家团队,提供高质量的病毒包装解决方案和技术支持。利用第三代慢病毒包装系统,我们优化源自HIV-1的慢病毒载体,进一步增强其安全性。过表达、干扰病毒包装、稳转株构建、文库包装与筛选等服务皆可提供。
》案例分享
泓迅生物利用制备的慢病毒颗粒转染目的细胞Hs578T,荧光检测显示荧光强度丰度强,表明大量Hs578T细胞已表达出荧光蛋白,目的细胞转染成功。
Reference
【1】Dong, W.; Kantor, B. Lentiviral Vectors for Delivery of Gene-Editing Systems Based on CRISPR/Cas: Current State and Perspectives.Viruses2021,13, 1288. https://doi.org/10.3390/v13071288.
【2】Milone MC, O'Doherty U. Clinical use of lentiviral vectors. Leukemia. 2018 Jul;32(7):1529-1541. doi: 10.1038/s41375-018-0106-0.
郑重声明:此文内容为本网站转载企业宣传资讯,目的在于传播更多信息,与本站立场无关。仅供读者参考,并请自行核实相关内容。